TOX3 Plasmide Double Nickase (h): sc-411992-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TOX3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TOX3 Double Nickase Plasmid (h) e il TOX3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TOX3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TOX3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411992-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TOX3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411992-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TOX3 codifica un fattore di trascrizione con dominio HMG-box (high mobility group) che si lega al DNA e modula la struttura della cromatina per regolare programmi di espressione genica associati alla differenziazione cellulare e alla trascrizione in risposta agli stimoli. È implicato nello sviluppo neuronale e nella regolazione dell’espressione genica dipendente dall’attività, e partecipa a reti trascrizionali più ampie che influenzano le decisioni di destino cellulare e le risposte allo stress. Studi genetici e di espressione associano TOX3 a vie rilevanti per la patologia, inclusi loci di suscettibilità in tumori ormono-responsivi e alterazioni osservate in contesti neuropsichiatrici e neurodegenerativi. Queste caratteristiche rendono TOX3 un bersaglio utile per analizzare i meccanismi di controllo trascrizionale e le reti geniche a valle in modelli cellulari umani.
TOX3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TOX3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TOX3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TOX3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TOX3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.