TM4SF1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404779-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TM4SF1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TM4SF1 Double Nickase Plasmid (h) e il TM4SF1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TM4SF1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TM4SF1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404779-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TM4SF1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404779-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TM4SF1 (transmembrane 4 L six family member 1) codifica una glicoproteina di superficie cellulare simile alle tetraspanine, che organizza i microdomini di membrana e modula le interazioni cellula–cellula e cellula–matrice. Partecipa a processi legati al rimodellamento del citoscheletro, all’adesione cellulare, alla migrazione e al cross-talk di segnalazione con le integrine e con le vie dei fattori di crescita. L’espressione di TM4SF1 è spesso utilizzata come marcatore di stati endoteliali ed epiteliali attivati ed è stata associata a programmi angiogenici, fenotipi invasivi e rimodellamento del microambiente tumorale. Di conseguenza, TM4SF1 è ampiamente studiato nei meccanismi alla base della biologia vascolare, della progressione metastatica e della segnalazione adattativa allo stress nei modelli di cancro.
TM4SF1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TM4SF1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TM4SF1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TM4SF1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TM4SF1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.