TLX2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423424

Panoramica

Tlx2 codifica il fattore di trascrizione homeobox TLX2 (noto anche come HOX11L1), un regolatore nucleare coinvolto nella specificazione del destino neuronale e nella maturazione durante lo sviluppo. TLX2 influenza programmi di espressione genica che coordinano differenziamento, migrazione e connettività nel sistema nervoso periferico e centrale, interfacciandosi con reti di sviluppo più ampie controllate da geni homeobox. Nei modelli murini, un’alterata attività di TLX2 è stata associata ad anomalie nella formazione del sistema nervoso enterico e nello sviluppo dei neuroni autonomi, collegandolo a vie che regolano la motilità intestinale e fenotipi neuroevolutivi. Queste caratteristiche rendono TLX2 un nodo utile per studiare il controllo trascrizionale dello sviluppo neurale e i circuiti effettori a valle.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TLX2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Tlx2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Tlx2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Tlx2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TLX2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Tlx2 per lo studio della segnalazione di TLX2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Tlx2 critici per la funzione di TLX2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Tlx2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TLX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal TLX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Tlx2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TLX2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR TLX2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Tlx2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Tlx2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.