TBC1D23 Plasmide Double Nickase (h): sc-417378-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TBC1D23 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TBC1D23 Double Nickase Plasmid (h) e il TBC1D23 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TBC1D23. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TBC1D23 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417378-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TBC1D23 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417378-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBC1D23 codifica una proteina contenente un dominio TBC (Tre-2/Bub2/Cdc16) che svolge una funzione nel traffico vescicolare e nello smistamento del carico, con ruoli riportati nel coordinare il trasporto dall’endosoma al Golgi tramite interazioni con il macchinario di ancoraggio dei golgin. Influenzando la dinamica delle membrane e la localizzazione delle proteine, TBC1D23 contribuisce all’organizzazione intracellulare delle vie di segnalazione e secretorie rilevanti per lo sviluppo neuronale e per le cellule polarizzate. L’alterazione di TBC1D23 è stata associata a fenotipi neuroevolutivi e a modifiche della morfologia cerebrale, a supporto della sua importanza nella formazione dei circuiti neurali e nell’omeostasi cellulare. Queste caratteristiche rendono TBC1D23 un bersaglio utile per studiare la regolazione, dipendente dal traffico, della distribuzione proteica, processi sinaptici o assonali e fenotipi cellulari rilevanti per la malattia in modelli umani.
TBC1D23 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TBC1D23 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TBC1D23. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TBC1D23. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TBC1D23 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.