STEAP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-410402-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- STEAP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il STEAP2 Double Nickase Plasmid (h) e il STEAP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira STEAP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
STEAP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410402-NIC | 20 µg | $410.00 |
STEAP2 (antigene epiteliale prostatico a sei domini transmembrana 2) è una metalloriduttasi associata alla membrana, arricchita nell’epitelio prostatico, che catalizza la riduzione degli ioni ferrici e cuprici, supportando l’assorbimento cellulare di ferro e rame e l’omeostasi redox. Modulando la disponibilità dei metalli, STEAP2 influenza le risposte allo stress ossidativo, il metabolismo mitocondriale e i programmi di segnalazione proliferativa legati a processi enzimatici dipendenti dal ferro. Un’espressione deregolata di STEAP2 è stata riportata nel carcinoma prostatico e in altre neoplasie, dove un metabolismo dei metalli alterato può rimodellare la crescita, la differenziazione e l’invasività delle cellule tumorali. In quanto enzima redox localizzato sulla superficie cellulare, STEAP2 è utile anche per studiare il traffico endosomiale/secretorio e l’interazione tra vie di segnalazione dipendenti dai metalli nelle cellule umane.
STEAP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus STEAP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di STEAP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di STEAP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con STEAP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.