Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
STARS Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406050
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- STARS Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico STARS, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: STARS Antibody (E-9): sc-393062
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
STARS Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406050 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
ABRA codifica STARS (striated muscle activator of Rho signaling), una proteina legante l’actina arricchita nel muscolo cardiaco e scheletrico, che collega la dinamica del citoscheletro al controllo trascrizionale. STARS promuove la segnalazione di RhoA e modula la regolazione, dipendente dall’actina, dell’espressione genica guidata da SRF/MRTF, integrando segnali meccanici e contrattili con programmi miogenici e di risposta allo stress. Attraverso queste vie, ABRA influenza la differenziazione muscolare, il rimodellamento ipertrofico e le risposte cellulari al carico e al danno. Un’attività deregolata di STARS è stata associata a firme trascrizionali rilevanti per cardiomiopatie e miopatie, rendendo ABRA un bersaglio utile per studiare la segnalazione dal citoscheletro al nucleo nella biologia muscolare.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO STARS (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ABRA in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ABRA insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ABRA a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina STARS.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ABRA per lo studio della segnalazione di STARS, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni ABRA critici per la funzione di STARS
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ABRA per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal STARS CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal STARS CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ABRA. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal STARS Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR STARS (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ABRA per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ABRA definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.