SSB-1 Plasmide Double Nickase (h): sc-408087-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SSB-1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SSB-1 Double Nickase Plasmid (h) e il SSB-1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SPSB1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SSB-1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408087-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SSB-1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408087-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **SPSB1** codifica **SSB-1**, una proteina adattatrice contenente un dominio **SPRY** che, tramite il suo **SOCS box**, collega substrati specifici ai complessi **Cullin-RING** di ubiquitina ligasi, promuovendone l’ubiquitinazione e la degradazione proteasomiale. Attraverso questa attività associata alle E3 ligasi, SSB-1 contribuisce alla regolazione della stabilità proteica in vie che controllano la segnalazione delle citochine e dell’immunità innata, inclusa la modulazione delle risposte correlate a **JAK/STAT**. SPSB1 è stato studiato come regolatore negativo della segnalazione infiammatoria e dei programmi genici stimolati dall’interferone, configurandosi come un nodo utile per analizzare i meccanismi di feedback nel controllo della difesa dell’ospite. Alterazioni dell’espressione o della funzione di SPSB1 possono influenzare la disregolazione immunitaria e fenotipi associati all’infiammazione, rendendolo rilevante per studi meccanicistici in modelli cellulari immunitari ed epiteliali.
SSB-1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SPSB1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SPSB1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SPSB1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SPSB1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.