SLC6A15 Plasmide Double Nickase (h): sc-410592-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC6A15 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC6A15 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC6A15 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC6A15. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC6A15 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410592-NIC | 20 µg | $410.00 |
SLC6A15 codifica un trasportatore di amminoacidi neutri dipendente da sodio e cloruro (B0AT2) che regola l’assorbimento cellulare di amminoacidi a catena ramificata e di altri amminoacidi neutri, influenzando la disponibilità intracellulare di amminoacidi e l’omeostasi metabolica. Modulando il flusso di substrati per la sintesi proteica e il metabolismo energetico, SLC6A15 contribuisce ai programmi di nutrient-sensing e alle reti di segnalazione a valle che rispondono alla disponibilità di amminoacidi. La sua espressione è arricchita nel sistema nervoso ed è stata associata all’adattamento metabolico neuronale e alla fisiologia sinaptica. Un’alterata regolazione di SLC6A15 è stata riportata in studi sulla neurobiologia legata allo stress e su fenotipi neuropsichiatrici, a supporto della sua rilevanza per la ricerca meccanicistica sul metabolismo cerebrale.
SLC6A15 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC6A15 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC6A15. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC6A15. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC6A15 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.