SLC38A10 Double Nickase Plasmid (m): sc-428214-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SLC38A10 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SLC38A10 Double-Nickase-Plasmid (m) und SLC38A10 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Slc38a10 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SLC38A10 Double Nickase Plasmid (m) | sc-428214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC38A10 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-428214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc38a10 kodiert SLC38A10, einen natriumgekoppelten Transporter für neutrale Aminosäuren, der in Mausgeweben zur zellulären Aminosäureaufnahme und zur Aufrechterhaltung der Aminosäurehomöostase beiträgt. Durch die Regulation intrazellulärer Pools wichtiger Substrate für die Proteinsynthese und den Ein-Kohlenstoff-Stoffwechsel kann SLC38A10 Nährstoffsensorik‑Signalwege wie die mTORC1‑Signalgebung, das Redoxgleichgewicht und ER‑Stressantworten beeinflussen. Veränderte Aminosäuretransporte wurden mit metabolischen und neurobiologischen Phänotypen in Verbindung gebracht, was Slc38a10 zu einem relevanten Ziel macht, um zu untersuchen, wie Transporteraktivität Zellwachstum, Stressanpassung und neuronale Funktion prägt. Die funktionelle Untersuchung von SLC38A10 unterstützt mechanistische Studien in Modellen von Nährstoffstress, mitochondrialer/ER‑Kommunikation (Crosstalk) und aminosäureabhängigen Signalnetzwerken.
SLC38A10 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Slc38a10-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Slc38a10 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Slc38a10-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Slc38a10-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.