SLC38A10 Plasmide Double Nickase (m): sc-428214-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC38A10 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC38A10 Double Nickase Plasmid (m) e il SLC38A10 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Slc38a10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC38A10 Plasmide Double Nickase (m) | sc-428214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC38A10 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-428214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc38a10 codifica SLC38A10, un trasportatore di amminoacidi neutri accoppiato al sodio che contribuisce all’assorbimento e all’omeostasi degli amminoacidi nelle cellule dei tessuti murini. Regolando i pool intracellulari di substrati chiave per la sintesi proteica e il metabolismo a un carbonio, SLC38A10 può influenzare vie di sensing dei nutrienti come la segnalazione di mTORC1, l’equilibrio redox e le risposte allo stress del reticolo endoplasmatico (ER). Alterazioni nel trasporto degli amminoacidi sono state associate a fenotipi metabolici e neurobiologici, rendendo Slc38a10 un bersaglio rilevante per studiare come l’attività dei trasportatori plasmi la crescita cellulare, l’adattamento allo stress e la funzione neuronale. L’analisi funzionale di SLC38A10 supporta studi meccanicistici in modelli di stress nutrizionale, crosstalk mitocondrio/ER e reti di segnalazione dipendenti dagli amminoacidi.
SLC38A10 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Slc38a10 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Slc38a10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Slc38a10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Slc38a10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.