Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
SLC26A3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403891
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC26A3 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico SLC26A3, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SLC26A3 Antibody (H-8): sc-376187
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC26A3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-403891 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
SLC26A3 codifica uno scambiatore di anioni di membrana (noto anche come DRA) che media uno scambio elettroneutro Cl⁻/HCO₃⁻ sulla superficie apicale delle cellule epiteliali, con ruoli di rilievo nell’assorbimento intestinale di liquidi ed elettroliti. Regolando la secrezione di bicarbonato e l’assorbimento di cloruro, SLC26A3 contribuisce al controllo del pH luminale e ai processi di trasporto epiteliale che si integrano con la gestione degli ioni dipendente da CFTR e con l’omeostasi della mucosa. L’alterazione o la disregolazione di SLC26A3 è stata associata alla diarrea congenita da cloruro e a fenotipi più ampi che coinvolgono la funzione di barriera epiteliale e la segnalazione infiammatoria nel tratto gastrointestinale. La sua espressione e attività sono quindi pertinenti per studi sulla differenziazione epiteliale, sulla fisiologia del trasporto e sul rimodellamento del microambiente intestinale associato all’infiammazione.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SLC26A3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SLC26A3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SLC26A3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SLC26A3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SLC26A3.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SLC26A3 per lo studio della segnalazione di SLC26A3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni SLC26A3 critici per la funzione di SLC26A3
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SLC26A3 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal SLC26A3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SLC26A3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SLC26A3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal SLC26A3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SLC26A3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SLC26A3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SLC26A3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.