Sialyltransferase 7A Plasmide Double Nickase (h): sc-406723-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Sialyltransferase 7A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Sialyltransferase 7A Double Nickase Plasmid (h) e il Sialyltransferase 7A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ST6GALNAC1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Sialyltransferase 7A Plasmide Double Nickase (h) | sc-406723-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sialyltransferase 7A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406723-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ST6GALNAC1 codifica la sialiltransferasi 7A, una glicosiltransferasi residente nel Golgi che trasferisce acido sialico su O-glicani contenenti GalNAc per generare strutture α2,6-sialilate come il sialil-Tn. Modellando la O-glicosilazione di tipo mucinico, influenza il traffico delle glicoproteine, le interazioni cellula–cellula e cellula–matrice e la segnalazione mediata da lectine all’interno delle vie di sialilazione e biosintesi dei glicoconiugati. Un’attività alterata di ST6GALNAC1 è associata a pattern glicani aberranti osservati nella biologia epiteliale e nel riconoscimento immunitario. La sialilazione deregolata degli O-glicani è stata collegata a cambiamenti nell’adesione, a fenotipi correlati all’invasione e a glicoepitopi associati ai tumori in molteplici contesti oncologici, a supporto della sua rilevanza negli studi sui meccanismi di malattia incentrati sulla glicomica.
Sialyltransferase 7A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ST6GALNAC1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ST6GALNAC1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ST6GALNAC1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ST6GALNAC1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.