Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SH2D1A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-422910
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SH2D1A Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico SH2D1A, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SH2D1A Antibody (A-8): sc-398118
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SH2D1A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-422910 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Sh2d1a codifica SH2D1A (SAP), una proteina adattatrice con dominio SH2 espressa prevalentemente nelle cellule T e nelle cellule NK, che collega i recettori della famiglia SLAM alla segnalazione a valle. Coordinando complessi prossimali al recettore e modulando chinasi e fosfatasi, SH2D1A influenza la formazione della sinapsi immunologica, le funzioni effettrici citotossiche e l’aiuto delle cellule T durante le risposte immunitarie antivirali e umorali. L’alterazione della segnalazione dipendente da SH2D1A compromette l’attivazione dei linfociti e l’omeostasi immunitaria, rendendola rilevante per studi su disregolazione immunitaria, suscettibilità alle infezioni virali e fenotipi linfoproliferativi. I modelli murini Sh2d1a sono ampiamente utilizzati per analizzare il contributo dell’asse SLAM–SAP alla biologia dei centri germinali e al controllo, mediato da cellule NK/T, di cellule infette o trasformate.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SH2D1A (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Sh2d1a in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Sh2d1a insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Sh2d1a a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SH2D1A.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Sh2d1a per lo studio della segnalazione di SH2D1A, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Sh2d1a critici per la funzione di SH2D1A
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Sh2d1a per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal SH2D1A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal SH2D1A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Sh2d1a. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal SH2D1A Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR SH2D1A (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Sh2d1a per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Sh2d1a definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.