SCML2 Plasmide Double Nickase (h): sc-405003-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SCML2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SCML2 Double Nickase Plasmid (h) e il SCML2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SCML2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SCML2 Antibody (F-7): sc-271097
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SCML2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405003-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SCML2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405003-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SCML2 (sex comb on midleg-like 2) è una proteina del gruppo Polycomb che contribuisce alla regolazione epigenetica dei geni attraverso il legame alla cromatina e il coordinamento di programmi di repressione trascrizionale. Nelle cellule umane, SCML2 è arricchita nella linea germinale maschile ed è implicata nell’instaurazione di stati della cromatina che supportano la spermatogenesi, inclusa la regolazione dell’espressione genica meiotica e le dinamiche della cromatina associate ai cromosomi sessuali. Modulando vie correlate ai Polycomb e il panorama delle modificazioni istoniche, SCML2 influenza reti geniche dello sviluppo e decisioni sull’identità cellulare. Un’alterazione della funzione o dell’espressione di SCML2 è stata associata a difetti nello sviluppo delle cellule germinali ed è stata esplorata nel contesto del controllo epigenetico deregolato osservato in programmi trascrizionali legati alla malignità.
SCML2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SCML2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SCML2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SCML2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SCML2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.