Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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S-100A3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405822
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- S-100A3 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico S-100A3, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: S-100A3 Antibody (A-11): sc-514339
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
S-100A3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-405822 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
S100A3 codifica la proteina S-100A3, appartenente alla famiglia S100 e in grado di legare il calcio, arricchita negli epiteli cheratinizzanti e nella biologia del follicolo pilifero, dove contribuisce all’organizzazione del citoscheletro e ai programmi di differenziamento cellulare. Attraverso cambiamenti conformazionali dipendenti dal Ca²⁺, S-100A3 può partecipare a interazioni proteina‑proteina che influenzano il rimodellamento strutturale dell’epitelio e processi sensibili allo stato redox. Un’espressione deregolata delle proteine S100, inclusa S100A3, è stata associata ad alterazioni degli stati di differenziamento, della segnalazione infiammatoria e di fenotipi associati ai tumori nei tessuti epiteliali. Di conseguenza, S100A3 viene spesso studiata in ricerche sullo sviluppo epiteliale, sulle risposte allo stress e su modifiche dell’architettura tissutale rilevanti per la malattia.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO S-100A3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene S100A3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del S100A3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto S100A3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina S-100A3.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di S100A3 per lo studio della segnalazione di S-100A3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni S100A3 critici per la funzione di S-100A3
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di S100A3 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal S-100A3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal S-100A3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus S100A3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal S-100A3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR S-100A3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia S100A3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio S100A3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.