RB1CC1 Plasmide Double Nickase (h): sc-416259-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RB1CC1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RB1CC1 Double Nickase Plasmid (h) e il RB1CC1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RB1CC1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RB1CC1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416259-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RB1CC1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416259-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RB1CC1 (nota anche come FIP200) codifica una grande proteina impalcatura che coordina l’avvio dell’autofagia attraverso il complesso ULK1–ATG13–RB1CC1 e collega il sensing dei nutrienti alla formazione del fagoforo. Oltre all’autofagia, RB1CC1 contribuisce alla regolazione della dinamica delle adesioni focali e dell’organizzazione del citoscheletro, influenzando la migrazione cellulare e la segnalazione di sopravvivenza. L’alterazione dell’autofagia dipendente da RB1CC1 è stata associata a una maggiore sensibilità allo stress cellulare e a una proteostasi modificata, processi frequentemente studiati nella neurodegenerazione e nella biologia del cancro. In quanto hub multifunzionale, RB1CC1 è ampiamente studiata per i suoi ruoli nell’adattamento metabolico, nel controllo qualità degli organelli e nel rimodellamento delle reti di segnalazione.
RB1CC1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RB1CC1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RB1CC1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RB1CC1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RB1CC1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.