Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RAGE Plasmide Double Nickase (m): sc-419040-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RAGE Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RAGE Double Nickase Plasmid (m) e il RAGE Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Ager. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RAGE Antibody (A-9): sc-365154
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RAGE Plasmide Double Nickase (m) | sc-419040-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RAGE Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419040-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Ager** codifica **RAGE** (recettore per i prodotti finali della glicazione avanzata), un recettore di riconoscimento di pattern multiligando che lega gli **AGE**, le **S100/calgranuline**, **HMGB1** e altri segnali associati al danno, amplificando le risposte infiammatorie e da stress. La segnalazione di RAGE si accoppia alle vie **MAPK** e **NF-κB** e promuove la produzione di citochine, lo stress ossidativo e l’espressione di molecole di adesione, influenzando il reclutamento dei leucociti e la funzione di barriera. Nei modelli murini, un’attività alterata di RAGE è stata collegata a infiammazione cronica, disfunzione vascolare, risposte allo stress metabolico e rimodellamento tissutale, rendendo **Ager** un nodo utile per lo studio della segnalazione dell’immunità innata e dell’omeostasi infiammatoria.
RAGE Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ager nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ager. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ager. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ager interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.