Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PTP22 Plasmide Double Nickase (h): sc-416917-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PTP22 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PTP22 Double Nickase Plasmid (h) e il PTP22 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PTPN22. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PTP22 Antibody (E-5): sc-393766
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PTP22 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416917-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PTP22 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416917-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTPN22 codifica la proteina tirosina fosfatasi 22 di tipo non recettoriale (PTP22), una fosfatasi citosolica che attenua la segnalazione a valle dei recettori dell’antigene de-fosforilando chinasi chiave e proteine adattatrici. Nelle cellule immunitarie, PTP22 modula le soglie di attivazione e influenza vie legate alla segnalazione del recettore delle cellule T e del recettore delle cellule B, incluso il controllo dipendente dalla fosforilazione degli output di MAPK e NF-κB. Studi genetici e funzionali hanno collegato un’alterata attività di PTP22 a una disregolazione della tolleranza immunitaria e della segnalazione infiammatoria. Di conseguenza, PTPN22 è ampiamente studiato in modelli di suscettibilità alle malattie autoimmuni, differenziamento delle cellule immunitarie e rimodellamento delle reti di segnalazione.
PTP22 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PTPN22 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PTPN22. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PTPN22. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PTPN22 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.