PSGR Plasmide Double Nickase (h): sc-405966-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PSGR Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PSGR Double Nickase Plasmid (h) e il PSGR Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira OR51E2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PSGR Plasmide Double Nickase (h) | sc-405966-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PSGR Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405966-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OR51E2 codifica il recettore umano accoppiato a proteina G specifico della prostata (PSGR), un recettore olfattivo espresso ectopicamente nell’epitelio prostatico e in altri tessuti periferici. In quanto GPCR a sette domini transmembrana, il PSGR è associato a una trasduzione del segnale dipendente dal ligando che può coinvolgere la via cAMP/PKA, flussi di calcio e vie a valle associate a MAPK e PI3K, che modulano la differenziazione epiteliale, la migrazione e le risposte infiammatorie. Un’alterazione dell’espressione di OR51E2 è stata riportata nel carcinoma della prostata e in condizioni patologiche prostatiche correlate, a supporto del suo impiego come strumento molecolare per interrogare programmi di segnalazione associati al tumore. Studi funzionali su OR51E2/PSGR forniscono inoltre indicazioni su come i GPCR chemosensoriali regolino il metabolismo cellulare e le interazioni con il microambiente al di fuori del sistema olfattivo.
PSGR Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus OR51E2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di OR51E2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di OR51E2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con OR51E2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.