Progesterone Receptor Plasmide Double Nickase (m): sc-422214-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Progesterone Receptor Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Progesterone Receptor Double Nickase Plasmid (m) e il Progesterone Receptor Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Pgr. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Progesterone Receptor Antibody (A-2): sc-398898
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Progesterone Receptor Plasmide Double Nickase (m) | sc-422214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Progesterone Receptor Plasmide Double Nickase (m2) | sc-422214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Pgr** codifica il recettore del progesterone, un recettore nucleare degli ormoni attivato dal legando che agisce come fattore di trascrizione per coordinare l’espressione genica dipendente dal progesterone. Dopo il legame con l’ormone, PGR regola l’accessibilità della cromatina e programmi trascrizionali che si intersecano con reti di co-regolatori e vie di segnalazione che controllano la progressione del ciclo cellulare, la differenziazione e le risposte infiammatorie. Nei tessuti riproduttivi, PGR è fondamentale per la recettività uterina, l’impianto, la decidualizzazione e lo sviluppo della ghiandola mammaria, collegando segnali endocrini al rimodellamento tissutale. Una segnalazione di **Pgr** deregolata e un’alterata bilancia tra le isoforme del recettore sono caratteristiche sperimentali ampiamente utilizzate in modelli di infertilità, biologia dell’endometrio e tumorigenesi sensibile agli ormoni.
Progesterone Receptor Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Pgr nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Pgr. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Pgr. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Pgr interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.