Plásmido Doble Nickase (h) PPARβ: sc-400523-NIC

PPARD codifica el receptor activado por proliferadores de peroxisomas beta/delta (PPARβ), un receptor nuclear activado por ligando que forma heterodímeros con RXR para regular programas transcripcionales que controlan el uso de lípidos, la oxidación de ácidos grasos y la homeostasis energética. PPARβ integra señales metabólicas e inflamatorias para coordinar la función mitocondrial, las respuestas al estrés oxidativo y las decisiones sobre el destino celular mediante la señalización de PPAR y redes transcripcionales más amplias de receptores nucleares. En muchos tipos celulares, la actividad de PPARD influye en el manejo de la glucosa y los lípidos, así como en la expresión génica sensible a citocinas, vinculándolo con mecanismos subyacentes a la desregulación metabólica y a fenotipos asociados a la inflamación. Las alteraciones en la señalización de PPARD/PPARβ se han investigado en contextos como la dislipidemia, la resistencia a la insulina y la biología tumoral, donde la reprogramación transcripcional puede afectar la proliferación, la diferenciación y las interacciones con el microambiente.

PPARβ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PPARD en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PPARD. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PPARD. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PPARD alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.