PPARβ Plasmide Double Nickase (h): sc-400523-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PPARβ Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PPARβ Double Nickase Plasmid (h) e il PPARβ Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PPARD. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PPARβ Antibody (F-10): sc-74517
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PPARβ Plasmide Double Nickase (h) | sc-400523-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PPARβ Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400523-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPARD codifica il recettore attivato dai proliferatori dei perossisomi beta/delta (PPARβ), un recettore nucleare attivato da ligandi che eterodimerizza con RXR per regolare programmi trascrizionali che controllano l’utilizzo dei lipidi, l’ossidazione degli acidi grassi e l’omeostasi energetica. PPARβ integra segnali metabolici e infiammatori per coordinare la funzione mitocondriale, le risposte allo stress ossidativo e le decisioni sul destino cellulare attraverso la segnalazione PPAR e reti trascrizionali più ampie dei recettori nucleari. In molti tipi cellulari, l’attività di PPARD influenza la gestione di glucosio e lipidi, così come l’espressione genica responsiva alle citochine, collegandolo a meccanismi alla base della disregolazione metabolica e dei fenotipi associati all’infiammazione. Alterazioni della segnalazione PPARD/PPARβ sono state studiate in contesti quali dislipidemia, insulino-resistenza e biologia tumorale, dove una riprogrammazione trascrizionale può influenzare proliferazione, differenziamento e interazioni con il microambiente.
PPARβ Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PPARD nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PPARD. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PPARD. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PPARD interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.