pki γ CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-411573

개요

PKIG는 단백질 키나아제 억제인자 감마(PKIγ)를 암호화하며, 이는 cAMP 의존성 단백질 키나아제 A(PKA)의 내인성 억제인자로서 기저 및 자극 유도 PKA 신호전달이 과도해지지 않도록 제한하는 데 기여합니다. PKIγ는 PKA의 촉매 소단위에 결합함으로써 GPCR–아데닐릴 사이클레이스–cAMP 경로 하위에서 전사, 대사, 세포주기 진행, 세포골격 역학에 대한 인산화 의존적 조절을 조정합니다. PKIG의 활성은 CREB 조절 유전자 발현과, 세포 스트레스 반응 및 분화 프로그램을 형성하는 보다 광범위한 키나아제 신호 네트워크와 교차합니다. cAMP/PKA 신호전달의 이상 조절은 종양 세포 성장, 내분비 신호 이상, 신경 기능 등 여러 질병 관련 과정에 관여하는 것으로 알려져 있어, PKIG는 기전 연구에 유용한 표적 노드가 됩니다.

pki γ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PKIG 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PKIG 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PKIG의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 pki γ 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 pki γ 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PKIG 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• pki γ 기능에 중요한 PKIG 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PKIG 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• pki γ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 pki γ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PKIG 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  pki γ HDR 플라스미드 (h) 및 pki γ HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PKIG 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PKIG 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.