Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) OST48: sc-403323-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) OST48 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide OST48 Double Nickase (h) et le plasmide OST48 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DDOST. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: OST48 Antibody (E-9): sc-74408
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) OST48 | sc-403323-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) OST48 | sc-403323-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **DDOST** code **OST48**, une sous-unité centrale du complexe **oligosaccharyltransférase (OST)** situé dans le réticulum endoplasmique rugueux, qui catalyse la **N‑glycosylation co‑traductionnelle** des protéines sécrétoires et membranaires naissantes. En soutenant le repliement des glycoprotéines et le contrôle qualité, OST48 contribue à la **protéostasie du RE**, à la signalisation de la **réponse aux protéines mal repliées (UPR)** et au trafic au sein de la voie sécrétoire. Des altérations de la N‑glycosylation et le stress du RE sont impliqués dans la biologie tumorale, les dysfonctionnements métaboliques et les processus neurodégénératifs, ce qui fait de DDOST un nœud pertinent pour l’étude de la régulation, dépendante des glycannes, des récepteurs, transporteurs et modulateurs immunitaires. DDOST/OST48 est également associé à l’organisation des sous‑complexes OST et à la sélectivité des substrats, le reliant à des effets étendus à l’échelle du protéome sur la maturation des protéines.
OST48 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DDOST dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DDOST. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DDOST. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DDOST.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.