Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
OST48 Plasmide Double Nickase (h): sc-403323-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- OST48 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il OST48 Double Nickase Plasmid (h) e il OST48 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DDOST. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: OST48 Antibody (E-9): sc-74408
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
OST48 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403323-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
OST48 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403323-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **DDOST** codifica **OST48**, una subunità centrale del complesso **oligosaccariltransferasi (OST)** nel reticolo endoplasmatico rugoso, che catalizza la **glicosilazione N‑legata co-traduzionale** delle proteine secretorie e di membrana nascenti. Sostenendo il ripiegamento delle glicoproteine e il controllo di qualità, OST48 contribuisce alla **proteostasi del RE**, alla segnalazione della **risposta alle proteine mal ripiegate (UPR)** e al traffico lungo la via secretoria. Alterazioni della N‑glicosilazione e stress del RE sono implicati nella biologia tumorale, nelle disfunzioni metaboliche e nei processi neurodegenerativi, rendendo **DDOST** un nodo rilevante per studiare la regolazione dipendente dai glicani di recettori, trasportatori e modulatori immunitari. **DDOST/OST48** è inoltre associato all’organizzazione dei sottocomplessi OST e alla selettività per i substrati, collegandolo a effetti ampi, su scala proteomica, nella maturazione proteica.
OST48 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DDOST nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DDOST. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DDOST. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DDOST interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.