Olfr988 Plasmide Double Nickase (m): sc-434380-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Olfr988 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Olfr988 Double Nickase Plasmid (m) e il Olfr988 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Olfr988. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Olfr988 Plasmide Double Nickase (m) | sc-434380-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Olfr988 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-434380-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Olfr988 codifica un recettore olfattivo nella famiglia dei recettori olfattivi (OR) del topo, una GPCR di classe A coinvolta principalmente nella rilevazione chemosensoriale e nella trasduzione del segnale nei neuroni sensoriali olfattivi. In seguito al legame con il ligando, gli OR si accoppiano a vie dipendenti da proteine G che aumentano i livelli di cAMP e attivano a valle canali ionici, favorendo la depolarizzazione neuronale e le risposte evocate dagli odori. Oltre all’olfatto canonico, è stata riportata un’espressione ectopica degli OR in specifici tessuti periferici, spingendo a indagare potenziali ruoli nella segnalazione cellulare e nella regolazione genica tessuto-specifica. La deregolazione della segnalazione mediata da GPCR e le alterazioni dei repertori dei recettori sensoriali sono rilevanti per gli studi sulla disfunzione olfattiva e, più in generale, sui processi fisiologici mediati da GPCR.
Olfr988 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Olfr988 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Olfr988. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Olfr988. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Olfr988 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.