OCT1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402232-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- OCT1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il OCT1 Double Nickase Plasmid (h) e il OCT1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC22A1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
OCT1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402232-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
OCT1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402232-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC22A1 codifica il trasportatore umano di cationi organici 1 (OCT1), un trasportatore di captazione polispecifico localizzato prevalentemente nella membrana plasmatica, dove media l’importazione indipendente dal sodio di ammine endogene e di diversi cationi xenobiotici. L’attività di OCT1 influenza la distribuzione cellulare dei cationi organici e contribuisce ai processi di trasporto epatico ed epiteliale che determinano l’esposizione intracellulare, l’accoppiamento metabolico e la detossificazione. Le variazioni nell’espressione o nella sequenza di SLC22A1 sono state associate ad alterazioni della funzione del trasportatore e a differenze interindividuali nella gestione dei farmaci, rendendolo rilevante per la farmacogenomica, la tossicologia e la biologia dei trasportatori. In ambito di ricerca, OCT1 viene comunemente studiato nel contesto della regolazione del trasporto di membrana, della specificità di substrato e delle vie che governano la captazione e la clearance cellulari.
OCT1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC22A1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC22A1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC22A1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC22A1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.