Oasl1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-433090

Panoramica

Oasl1 (2′-5′-oligoadenilato sintetasi-simile 1) è un gene murino indotto dall’interferone, implicato nella regolazione dell’immunità innata durante le risposte antivirali. A differenza dei membri cataliticamente attivi della famiglia OAS, Oasl1 agisce principalmente tramite interazioni proteina–proteina e interazioni associate all’RNA che modulano la segnalazione dell’interferone di tipo I e i programmi trascrizionali a valle. È collegato al controllo delle vie dei fattori regolatori dell’interferone e di circuiti infiammatori più ampi che influenzano l’attivazione delle cellule immunitarie e la produzione di citochine. Un’attività di Oasl1 deregolata è quindi rilevante per lo studio dei meccanismi alla base di risposte interferoniche aberranti e di patologie immunomediate in modelli di infezione e di malattie infiammatorie.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Oasl1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Oasl1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Oasl1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Oasl1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Oasl1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Oasl1 per lo studio della segnalazione di Oasl1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Oasl1 critici per la funzione di Oasl1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Oasl1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Oasl1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Oasl1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Oasl1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Oasl1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Oasl1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Oasl1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Oasl1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.