NOTCH2NL Plasmide Double Nickase (h): sc-417192-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NOTCH2NL Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NOTCH2NL Double Nickase Plasmid (h) e il NOTCH2NL Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NOTCH2NL. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NOTCH2NL Antibody (39-Y): sc-100307
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NOTCH2NL Plasmide Double Nickase (h) | sc-417192-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NOTCH2NL Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417192-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOTCH2NL codifica un membro, specifico dell’uomo, della famiglia di proteine simil-Notch2 che modula la segnalazione canonica di Notch, una via centrale per la specificazione del destino cellulare, la proliferazione e la differenziazione durante lo sviluppo del sistema nervoso. Influenzando l’attività dei recettori Notch e i programmi trascrizionali a valle, NOTCH2NL contribuisce alla regolazione del mantenimento dei progenitori neurali e della tempistica della differenziazione neuronale. Variazioni del numero di copie e alterazioni dell’espressione dei paraloghi di NOTCH2NL sono state associate a fenotipi dello sviluppo del cervello umano e a disturbi del neurosviluppo, a sostegno della sua rilevanza per studi sull’espansione corticale, la maturazione sinaptica e le reti regolatorie geniche dello sviluppo.
NOTCH2NL Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NOTCH2NL nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NOTCH2NL. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NOTCH2NL. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NOTCH2NL interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.