Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NOS2/iNOS Plasmide Double Nickase (h): sc-400066-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NOS2/iNOS Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NOS2/iNOS Double Nickase Plasmid (h) e il NOS2/iNOS Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NOS2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NOS2/iNOS Antibody (C-11): sc-7271
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NOS2/iNOS Plasmide Double Nickase (h) | sc-400066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NOS2/iNOS Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **NOS2** codifica la **nitric oxide synthase inducibile (iNOS)**, un enzima **indipendente dal Ca2+** che, durante la stimolazione infiammatoria, genera elevate quantità di **ossido nitrico (NO)** a partire dalla **L-arginina**. Il NO derivato da iNOS modula la segnalazione dell’immunità innata, la difesa antimicrobica e lo stress ossidativo/nitrosativo attraverso effetti sull’omeostasi redox, la **S-nitrosilazione** e la formazione di **specie reattive dell’azoto**. L’espressione di NOS2 è regolata da vie indotte da citochine e da recettori di riconoscimento dei pattern, incluse le cascate **NF-κB**, **JAK/STAT** e **MAPK**. Un’attività deregolata di NOS2 è stata associata a infiammazione cronica e danno tissutale ed è spesso studiata nel contesto della biologia del microambiente tumorale, della neuroinfiammazione e delle risposte allo stress cardiometabolico.
NOS2/iNOS Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NOS2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NOS2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NOS2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NOS2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.