NOL11 Plasmide Double Nickase (h): sc-411835-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NOL11 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NOL11 Double Nickase Plasmid (h) e il NOL11 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NOL11. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NOL11 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411835-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NOL11 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411835-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOL11 codifica una proteina nucleolare che sostiene la biogenesi dei ribosomi partecipando alla trascrizione del pre‑rRNA e agli eventi precoci di processamento necessari alla maturazione della subunità piccola. Agisce all’interno di reti regolatorie nucleolari collegate all’attività dell’RNA polimerasi I, alle modifiche dell’rRNA e all’assemblaggio delle particelle preribosomali, influenzando così la capacità traduttiva globale. Ci si aspetta che l’alterazione di NOL11 inneschi risposte di stress nucleolare che si intersecano con il controllo del ciclo cellulare e con vie di sorveglianza del genoma, come la segnalazione di p53. Poiché una biogenesi ribosomiale deregolata è una caratteristica comune dei disturbi proliferativi e delle ribosomopatie, NOL11 è spesso oggetto di studio in ricerche sul controllo della crescita, sulla proteostasi e su programmi trascrizionali di adattamento allo stress.
NOL11 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NOL11 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NOL11. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NOL11. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NOL11 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.