NFRκB Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-433432
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NFRκB Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico NFRκB, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NFRκB Antibody (A-12): sc-514977
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NFRκB Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-433432 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il gene murino **Nfrkb** codifica **NFRκB**, un fattore nucleare associato alla cromatina e alla regolazione trascrizionale correlata a **NF-κB**, in grado di influenzare programmi di espressione genica responsivi agli stimoli. NFRκB è stato collegato a complessi proteici nucleari implicati in processi dipendenti dal DNA, inclusi il controllo della trascrizione e il mantenimento della stabilità del genoma. Modulando l’espressione contestuale di geni infiammatori e della risposta allo stress, **Nfrkb** può modellare vie che governano proliferazione, differenziamento e sopravvivenza cellulare. La disregolazione di reti regolatorie adiacenti a NF-κB è frequentemente studiata in relazione a disfunzioni immunitarie, fenotipi infiammatori e stati trascrizionali rilevanti per il cancro.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO NFRκB (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Nfrkb in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Nfrkb insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Nfrkb a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina NFRκB.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Nfrkb per lo studio della segnalazione di NFRκB, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Nfrkb critici per la funzione di NFRκB
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Nfrkb per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal NFRκB CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal NFRκB CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Nfrkb. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal NFRκB Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR NFRκB (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Nfrkb per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Nfrkb definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.