NALP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402588-NIC

Il gene umano **NLRP1** codifica la proteina sensore **NALP1**, un recettore con ripetizioni ricche in leucina e dominio di legame ai nucleotidi (NLR) che funge da nucleo per l’assemblaggio dell’inflammasoma in risposta a stress cellulari e segnali associati ai patogeni. Una volta attivata, NALP1 promuove l’attivazione della caspasi-1 e la maturazione di **IL‑1β** e **IL‑18**, collegando il rilevamento dell’immunità innata alla segnalazione piroptotica e al rilascio di citochine infiammatorie. Questa via si interseca con il priming mediato da **NF‑κB**, la sorveglianza della proteostasi e i checkpoint di morte cellulare che modellano l’omeostasi epiteliale e immunitaria. Un’attività deregolata di NLRP1 è stata associata a fenotipi infiammatori e autoimmuni ed è spesso studiata nel contesto dell’infiammazione dei tessuti barriera e della segnalazione innata indotta da stress.

NALP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NLRP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NLRP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NLRP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NLRP1 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.