Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Myosin Ic Plasmide Double Nickase (h): sc-403013-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Myosin Ic Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Myosin Ic Double Nickase Plasmid (h) e il Myosin Ic Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MYO1C. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Myosin Ic Antibody (13): sc-136544
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Myosin Ic Plasmide Double Nickase (h) | sc-403013-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Myosin Ic Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403013-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano MYO1C codifica la miosina Ic, un motore basato sull’actina che collega il citoscheletro corticale alle membrane per supportare il traffico di membrana, i cambiamenti della forma cellulare e la meccanotrasduzione. La miosina Ic contribuisce al trasporto endocitico ed esocitico, alla regolazione della tensione corticale e al rimodellamento dipendente dall’actina a livello della membrana plasmatica, integrando segnali che influenzano adesione e motilità. In virtù di queste funzioni, MYO1C è comunemente studiato in vie che regolano la dinamica delle vescicole, l’organizzazione del citoscheletro e il traffico dei recettori. La disregolazione di questi processi è stata associata ad alterazioni della migrazione cellulare e dei comportamenti di segnalazione rilevanti per la biologia del cancro, la regolazione metabolica e la ricerca in neurobiologia.
Myosin Ic Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MYO1C nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MYO1C. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MYO1C. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MYO1C interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.