MORF Plasmide Double Nickase (h): sc-418605-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MORF Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MORF Double Nickase Plasmid (h) e il MORF Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KAT6B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MORF Plasmide Double Nickase (h) | sc-418605-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MORF Plasmide Double Nickase (h2) | sc-418605-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KAT6B codifica per l’acetiltransferasi della lisina umana MORF (nota anche come MYST4), un’acetiltransferasi istonica nucleare che modifica la cromatina per regolare programmi trascrizionali che controllano le decisioni sul destino cellulare, la proliferazione e la differenziazione. MORF agisce all’interno di complessi multiproteici che modificano la cromatina e contribuisce all’acetilazione di istoni come H3, modulando l’accessibilità di promotori ed enhancer nelle reti geniche dello sviluppo. L’attività di KAT6B si intreccia con la regolazione epigenetica della specificazione di linea e con processi basati sul DNA, inclusi l’inizio e l’elongazione della trascrizione. La deregolazione della funzione e del dosaggio di KAT6B/MORF è associata a sindromi dello sviluppo e alla riprogrammazione trascrizionale legata al cancro, rendendolo un bersaglio chiave per lo studio dei meccanismi di malattia guidati dalla cromatina.
MORF Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KAT6B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KAT6B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KAT6B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KAT6B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.