Metaxin 3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-415611

Panoramica

MTX3 codifica la metaxina 3, un membro della famiglia delle metaxine coinvolto nella biologia mitocondriale, inclusa l’organizzazione della membrana mitocondriale esterna e la biogenesi dei complessi di importazione proteica mitocondriale. Le metaxine sono associate a processi quali il traffico delle proteine mitocondriali, il mantenimento dell’integrità dei mitocondri e il coordinamento del metabolismo con le risposte allo stress. Un’omeostasi mitocondriale alterata è una caratteristica comune in diversi contesti patologici, rendendo MTX3 un locus utile per studiare i meccanismi che collegano la dinamica mitocondriale alla sopravvivenza e alla differenziazione cellulare. L’analisi funzionale di MTX3 può aiutare a chiarire come le vie di importazione mitocondriale influenzino la segnalazione a valle e i programmi cellulari dipendenti dall’energia.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Metaxin 3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MTX3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MTX3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MTX3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Metaxin 3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MTX3 per lo studio della segnalazione di Metaxin 3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni MTX3 critici per la funzione di Metaxin 3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MTX3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Metaxin 3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Metaxin 3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MTX3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Metaxin 3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Metaxin 3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MTX3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MTX3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.