MerTK Plasmide Double Nickase (h): sc-401629-NIC

MERTK codifica per la tirosin-chinasi recettoriale MerTK, membro della famiglia TAM che regola l’efferocitosi e l’omeostasi immunitaria riconoscendo la fosfatidilserina tramite ligandi ponte come GAS6 e PROS1. L’attivazione di MerTK innesca a valle le vie di segnalazione PI3K–AKT, MAPK/ERK e STAT, modulando i programmi di rimozione di macrofagi e microglia, limitando la produzione di citochine infiammatorie e sostenendo il rimodellamento tissutale. In biologia del cancro, una segnalazione aberrante di MerTK è stata collegata alla sopravvivenza delle cellule tumorali, all’invasività e all’elusione immunitaria all’interno del microambiente tumorale. Nel sistema nervoso e nella retina, la fagocitosi dipendente da MerTK è rilevante per l’eliminazione dei detriti e per la regolazione dell’infiammazione, offrendo un quadro di riferimento per studiare la disregolazione delle vie dell’immunità innata associata alle malattie.

MerTK Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MERTK nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MERTK. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MERTK. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MERTK interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.