KDEL receptor 1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402751-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- KDEL receptor 1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il KDEL receptor 1 Double Nickase Plasmid (h) e il KDEL receptor 1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KDELR1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
KDEL receptor 1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402751-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KDEL receptor 1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402751-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KDELR1 codifica il recettore KDEL 1, un recettore chiave per il recupero dal Golgi al RE che riconosce le proteine solubili del RE contenenti il motivo KDEL e mantiene la proteostasi del RE. Collegando il legame del ligando nel Golgi al traffico retrogrado mediato da COPI e al rilascio nel RE dipendente dal pH, KDELR1 contribuisce a regolare la via secretoria precoce, il controllo qualità del RE e la segnalazione adattativa allo stress. Un’alterazione della funzione di KDELR1 può compromettere lo smistamento proteico e l’omeostasi secretoria, influenzando processi quali la dinamica della risposta alle proteine non correttamente ripiegate (UPR) e la fedeltà del traffico intracellulare. Le alterazioni del trasporto RE–Golgi e delle vie di proteostasi sono di ampia rilevanza per la ricerca sullo stress cellulare, la segnalazione immunitaria e diversi fenotipi associati al misfolding proteico.
KDEL receptor 1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KDELR1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KDELR1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KDELR1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KDELR1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.