KCNE1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404317-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- KCNE1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il KCNE1 Double Nickase Plasmid (h) e il KCNE1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KCNE1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
KCNE1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404317-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KCNE1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404317-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNE1 codifica una subunità β transmembrana a singolo passaggio che modula la funzione dei canali del potassio voltaggio-dipendenti, in particolare il complesso KCNQ1/Kv7.1 che veicola la corrente rettificatrice ritardata lenta (IKs). Regolando la cinetica di gating del canale, il traffico verso la membrana e la sensibilità farmacologica, KCNE1 contribuisce a controllare la ripolarizzazione cardiaca e l’eccitabilità cellulare. Questa attività collega KCNE1 alle vie elettrofisiologiche che controllano la durata del potenziale d’azione e l’omeostasi ionica nei cardiomiociti e in altri tessuti eccitabili. Variazioni genetiche o un’espressione deregolata di KCNE1 sono state associate alla suscettibilità a aritmie ereditarie e a fenotipi uditivi, attraverso effetti sul flusso di potassio nel cuore e nell’orecchio interno.
KCNE1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KCNE1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KCNE1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KCNE1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KCNE1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.