JMJD3 Plasmide Double Nickase (h): sc-401883-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- JMJD3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il JMJD3 Double Nickase Plasmid (h) e il JMJD3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KDM6B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
JMJD3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401883-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JMJD3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401883-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KDM6B codifica la demetilasi istonica JMJD3, un enzima con dominio Jumonji C (JmjC) che rimuove i segni repressivi H3K27me3 favorendo l’attivazione trascrizionale. Controbilanciando la metilazione mediata da PRC2/EZH2, JMJD3 contribuisce a regolare l’accessibilità della cromatina durante la differenziazione, l’induzione di geni infiammatori e programmi specifici di linea in risposta a segnali quali NF-κB e le vie delle citochine. L’attività di KDM6B influenza le transizioni di destino cellulare, la trascrizione associata alla senescenza e il rimodellamento epigenetico nello sviluppo e nella riparazione tissutale. La disregolazione di JMJD3 è stata collegata a stati infiammatori aberranti e a paesaggi trascrizionali alterati in contesti oncologici e neurosviluppativi, rendendolo un bersaglio utile per la ricerca meccanicistica in epigenetica.
JMJD3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KDM6B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KDM6B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KDM6B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KDM6B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.