IFIT3 Plasmide Double Nickase (h): sc-403557-NIC

La proteina indotta dall’interferone con ripetizioni tetratricopeptidiche 3 (IFIT3) è il prodotto di un gene stimolato dall’interferone che partecipa alla difesa antivirale innata a valle della segnalazione degli interferoni di tipo I/III e dei recettori di riconoscimento dei pattern. IFIT3 forma complessi con altri membri della famiglia IFIT e modula il sensing dell’RNA, il controllo della traduzione e l’amplificazione delle risposte interferoniche guidate da JAK–STAT, influenzando l’espressione di programmi effettori antivirali più ampi. Attraverso queste attività, IFIT3 contribuisce alla restrizione cellulare della replicazione virale e modella reti di segnalazione infiammatoria come NF-κB e la trascrizione dipendente da IRF. Un’espressione deregolata di IFIT3 è stata associata ad alterazioni della risposta antivirale e a stati infiammatori, rendendola un bersaglio utile per studi meccanicistici in biologia delle infezioni, immunologia e segnalazione interferonica correlata al cancro.

IFIT3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IFIT3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IFIT3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IFIT3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IFIT3 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.