Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Plasmide Double Nickase (h): sc-400314-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Double Nickase Plasmid (h) e il Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HDAC6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Histone Deacetylase 6 Antibody (D-11): sc-28386
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Plasmide Double Nickase (h) | sc-400314-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400314-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HDAC6 codifica l’istone deacetilasi 6, una deacetilasi della lisina prevalentemente citoplasmatica che regola la proteostasi e la dinamica del citoscheletro deacetilando substrati non istonici come α-tubulina, HSP90 e cortactina. Attraverso queste attività, HDAC6 influenza il trasporto dipendente dai microtubuli, la formazione di aggresomi, le vie autofagia–lisosoma, le risposte allo stress e la motilità cellulare. HDAC6 interagisce inoltre con il controllo qualità dipendente dall’ubiquitina tramite il suo dominio di legame per l’ubiquitina, collegando l’aggregazione proteica ai meccanismi di rimozione. Una segnalazione di HDAC6 deregolata è stata associata a neurodegenerazione, invasione delle cellule tumorali e fenotipi infiammatori, rendendola un nodo ampiamente studiato nelle vie controllate dall’acetilazione.
Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HDAC6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HDAC6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HDAC6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HDAC6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.