HAPLN1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403874-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HAPLN1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HAPLN1 Double Nickase Plasmid (h) e il HAPLN1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HAPLN1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HAPLN1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403874-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HAPLN1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403874-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HAPLN1 (link protein 1 per ialuronano e proteoglicani) codifica una glicoproteina della matrice extracellulare che stabilizza gli aggregati di ialuronano con proteoglicani a solfato di condroitina, sostenendo l’assemblaggio della matrice, l’idratazione e la biomeccanica dei tessuti. HAPLN1 contribuisce alle interazioni cellula–matrice e ai programmi di organizzazione della ECM che influenzano adesione, migrazione e meccanotrasduzione, in particolare nei tessuti connettivi e in microambienti simili alla cartilagine. Alterazioni dell’espressione di HAPLN1 e della sua attività di collegamento della matrice sono state associate a un rimodellamento stromale disregolato, a vie correlate alla fibrosi e alla composizione del microambiente tumorale, rendendolo un nodo utile per studiare la dinamica della matrice extracellulare in modelli di malattie umane. In quanto fattore secreto/associato alla ECM, HAPLN1 è comunemente analizzato nella biologia dei sistemi del turnover della matrice, del rimodellamento infiammatorio e della formazione di nicchie legate alla metastasi.
HAPLN1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HAPLN1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HAPLN1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HAPLN1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HAPLN1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.