GluR-6 Plasmide Double Nickase (h): sc-402982-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GluR-6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GluR-6 Double Nickase Plasmid (h) e il GluR-6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GRIK2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GluR-6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402982-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GluR-6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402982-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIK2 codifica per la subunità GluR-6 del recettore ionotropico del glutammato di tipo kainato, un canale cationico attivato da ligando che contribuisce alla rapida neurotrasmissione eccitatoria e alla plasticità sinaptica nel sistema nervoso centrale. GluR-6 partecipa alle vie di segnalazione glutamatergiche regolando il flusso di Na⁺/K⁺, modellando la depolarizzazione postsinaptica e modulando il rilascio di neurotrasmettitori tramite complessi recettoriali pre- e postsinaptici. Attraverso una segnalazione dipendente dall’attività e l’interazione (cross-talk) con cascate calcio-dipendenti, GRIK2 influenza lo sviluppo neuronale, l’eccitabilità dei circuiti e i cambiamenti a lungo termine della forza sinaptica. Le variazioni genetiche e funzionali di GRIK2 sono state studiate in relazione a fenotipi neuroevolutivi e neuropsichiatrici, inclusi un’alterazione dell’equilibrio eccitatorio–inibitorio e una maggiore suscettibilità all’ipereccitabilità di rete associata alle crisi epilettiche.
GluR-6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GRIK2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GRIK2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GRIK2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GRIK2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.