GBX2 Plasmide Double Nickase (m): sc-420503-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GBX2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GBX2 Double Nickase Plasmid (m) e il GBX2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Gbx2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GBX2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420503-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GBX2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420503-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Gbx2 codifica il fattore di trascrizione homeobox GBX2, un regolatore che si lega al DNA in modo sequenza-specifico e che contribuisce a organizzare l’embrione nelle fasi precoci, aiutando a definire l’identità regionale all’interno del tubo neurale e del rombencefalo in sviluppo. Nel topo, l’attività di GBX2 si integra con reti di segnalazione dello sviluppo, incluse le vie WNT/β-catenina, FGF e dell’acido retinoico, per coordinare la specificazione dei progenitori, la segmentazione e la differenziazione neuronale. La perturbazione di Gbx2 altera programmi trascrizionali che controllano le decisioni di destino cellulare e la morfogenesi dei tessuti, rendendolo rilevante per studi su fenotipi neuroevolutivi congeniti e sulle reti di regolazione genica. In quanto fattore di trascrizione nucleare, GBX2 è utilizzato anche come marcatore e come nodo meccanicistico per analizzare la progressione di linea e il controllo spazio-temporale dell’espressione genica durante lo sviluppo.
GBX2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Gbx2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Gbx2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Gbx2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Gbx2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.