Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Fra1 Plasmide Double Nickase (m): sc-420402-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Fra1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Fra1 Double Nickase Plasmid (m) e il Fra1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Fosl1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Fra1 Antibody (D-3): sc-376148
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Fra1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420402-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Fra1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420402-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Fosl1** codifica l’antigene 1 correlato a Fos (**Fra1**), un fattore di trascrizione con dominio **basic leucine zipper** che eterodimerizza con le proteine **JUN** per formare complessi **AP-1** e regolare l’espressione genica responsiva agli stimoli. Fra1 integra input di segnalazione **MAPK/ERK** e di altre vie attivate dallo stress per controllare programmi legati a proliferazione, differenziamento, migrazione e rimodellamento della matrice extracellulare. In contesti immunitari e stromali, Fra1 contribuisce a reti trascrizionali infiammatorie e alla regolazione di geni specifici di linea. Un’attività AP-1/Fra1 deregolata è frequentemente associata a stati di segnalazione oncogeni e a rimodellamento tissutale patologico, rendendo **Fosl1** un nodo utile per studi meccanicistici del controllo trascrizionale in vie rilevanti per la malattia.
Fra1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Fosl1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Fosl1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Fosl1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Fosl1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.