FPR3 Plasmide Double Nickase (h): sc-406910-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FPR3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FPR3 Double Nickase Plasmid (h) e il FPR3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FPR3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FPR3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406910-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FPR3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406910-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il recettore 3 per i peptidi formilati (FPR3) è un recettore accoppiato a proteine G (GPCR) di classe A espresso prevalentemente nelle linee leucocitarie, dove contribuisce al rilevamento chemiotattico e alla modulazione delle risposte immunitarie innate. In seguito al legame con il ligando, FPR3 può accoppiarsi a proteine Gi e influenzare la segnalazione dei secondi messaggeri, i flussi di calcio e le vie MAPK/ERK a valle, che modellano la migrazione cellulare, la degranulazione e i programmi citochinici. La segnalazione di FPR3 si interseca con reti infiammatorie più ampie che coordinano la difesa dell’ospite e l’omeostasi tissutale, rendendolo rilevante per studi sull’attivazione e la risoluzione immunitaria. Un’espressione o un’attività alterata dei recettori per i peptidi formilati è stata associata a un’infiammazione disregolata in contesti di malattia umana, a sostegno di ricerche meccanicistiche sull’immunopatologia senza implicare un impatto terapeutico.
FPR3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FPR3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FPR3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FPR3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FPR3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.