Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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FOXC2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420370
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FOXC2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico FOXC2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FOXC2 Antibody (G-7): sc-515234
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FOXC2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-420370 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Foxc2 codifica il fattore di trascrizione della famiglia forkhead box FOXC2, un regolatore legante il DNA che coordina programmi di espressione genica coinvolti nel controllo dell’identità delle cellule mesenchimali, dello sviluppo vascolare e linfatico e del rimodellamento del tessuto adiposo nel topo. FOXC2 agisce all’interno di reti trascrizionali nucleari che si intersecano con vie di segnalazione dello sviluppo come TGF-β e Notch, influenzando la differenziazione endoteliale, l’organizzazione della matrice extracellulare e processi simili alla transizione epitelio-mesenchimale. Un’alterazione dell’attività di FOXC2 è stata associata a una linfangiogenesi deregolata, a pattern vascolari anomali e a cambiamenti degli stati metabolici e stromali comunemente studiati in modelli di disturbi dello sviluppo e di biologia del microambiente tumorale. Queste funzioni rendono Foxc2 un nodo utile per analizzare il controllo trascrizionale della morfogenesi tissutale e delle decisioni di destino cellulare.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FOXC2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Foxc2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Foxc2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Foxc2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FOXC2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Foxc2 per lo studio della segnalazione di FOXC2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Foxc2 critici per la funzione di FOXC2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Foxc2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal FOXC2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal FOXC2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Foxc2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal FOXC2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR FOXC2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Foxc2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Foxc2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.