Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
FKBP51 Plasmide Double Nickase (m): sc-420365-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FKBP51 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FKBP51 Double Nickase Plasmid (m) e il FKBP51 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Fkbp5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FKBP51 Antibody (D-4): sc-271547
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FKBP51 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420365-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FKBP51 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420365-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Fkbp5 codifica FKBP51, un co-chaperone immunofilina che si lega a HSP90 e modula i complessi dei recettori steroidei, inclusi i recettori dei glucocorticoidi e del progesterone, plasmando così la sensibilità recettoriale e la regolazione a feedback. FKBP51 interagisce inoltre con la segnalazione della risposta allo stress influenzando l’attività di AKT/PHLPP e programmi infiammatori correlati a NF-κB, collegando la proteostasi al controllo trascrizionale. Nei sistemi murini, alterazioni dell’espressione di Fkbp5 sono state associate a una disregolazione della segnalazione dell’asse ipotalamo–ipofisi–surrene, dell’omeostasi metabolica e dei processi neuroimmuni. Queste funzioni rendono FKBP51 un nodo utile per analizzare le vie che accoppiano il macchinario delle chaperonine a fenotipi endocrini e di adattamento allo stress, in vivo e in colture cellulari.
FKBP51 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Fkbp5 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Fkbp5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Fkbp5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Fkbp5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.