Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FGFR-4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-420344
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- FGFR-4 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im FGFR-4-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: FGFR-4: sc-136988
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
FGFR-4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-420344 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Fgfr4 kodiert den Fibroblasten-Wachstumsfaktor-Rezeptor 4 (FGFR-4), eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die FGF-Liganden und Heparansulfat bindet und dadurch die Signalübertragung über die MAPK/ERK-, PI3K–AKT-, PLCγ/PKC- und STAT-Wege initiiert. In Mauszellen reguliert FGFR-4 Proliferation, Differenzierung und Überleben und übernimmt darüber hinaus Funktionen in der Gewebeentwicklung und der metabolischen Homöostase. Veränderte FGFR-4-Signalisierung wurde in mehreren Krebsmodell-Kontexten mit fehlregulierten Wachstumsfaktorantworten, Veränderungen in Programmen der Zellmigration und -invasion sowie mit einem Umbau des Tumormikromilieus in Verbindung gebracht. Da FGFR-4 extrazelluläre Signale mit transkriptionellen und zytoskelettalen Outputs verknüpft, wird es häufig in Rezeptor-Signalnetzwerken, in der Feedback-Regulation und im Pathway-Crosstalk mit anderen RTKs untersucht.
Das FGFR-4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Fgfr4-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Fgfr4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Fgfr4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FGFR-4-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Fgfr4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FGFR-4-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Fgfr4-Exone abzielen, die für die FGFR-4-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Fgfr4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom FGFR-4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom FGFR-4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Fgfr4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FGFR-4 HDR-Plasmid (m) und FGFR-4 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Fgfr4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Fgfr4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.