FEZF2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406571

Panoramica

FEZF2 (FEZ family zinc finger 2) codifica un fattore di trascrizione con domini a dita di zinco di tipo C2H2 che funge da regolatore chiave dello sviluppo del prosencefalo e della specificazione dei sottotipi neuronali. Nel neurosviluppo umano, FEZF2 influenza la corticogenesi indirizzando il destino dei neuroni di proiezione corticotalamici e coordinando programmi trascrizionali legati alla guida assonale, alla migrazione neuronale e alla regionalizzazione. Attraverso il suo ruolo in reti geniche che definiscono la linea cellulare, FEZF2 contribuisce all’istituzione dei circuiti corticali e della connettività sinaptica. La disregolazione o la variabilità genetica nelle vie regolatorie associate a FEZF2 è stata studiata nel contesto di fenotipi del neurosviluppo e neuropsichiatrici, rendendolo rilevante per studi meccanicistici sullo sviluppo cerebrale e sull’identità neuronale.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FEZF2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FEZF2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FEZF2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FEZF2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FEZF2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FEZF2 per lo studio della segnalazione di FEZF2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni FEZF2 critici per la funzione di FEZF2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FEZF2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal FEZF2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FEZF2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FEZF2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal FEZF2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FEZF2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FEZF2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FEZF2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.