Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ERRβ Plasmide Double Nickase (h): sc-402868-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ERRβ Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ERRβ Double Nickase Plasmid (h) e il ERRβ Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ESRRB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ERRβ Plasmide Double Nickase (h) | sc-402868-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ERRβ Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402868-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ESRRB codifica il recettore beta correlato agli estrogeni (ERRβ), un recettore nucleare orfano che agisce come fattore di trascrizione specifico per la sequenza, regolando programmi genici coinvolti nell’identità cellulare, nella differenziazione e nell’adattamento metabolico. ERRβ partecipa alla segnalazione dei recettori nucleari legandosi agli elementi di risposta correlati agli estrogeni e modulando la trascrizione in collaborazione con co-regolatori, integrando segnali provenienti da vie di sviluppo e da percorsi responsivi allo stress. Nelle cellule umane, l’attività di ESRRB è stata associata alla regolazione di reti trascrizionali di tipo staminale, alla determinazione del destino di linea e a programmi del metabolismo mitocondriale e ossidativo. La deregolazione della segnalazione ESRRB/ERRβ è stata studiata in contesti di stati di differenziazione alterati e fenotipi proliferativi, rendendola rilevante per studi meccanicistici del controllo trascrizionale in modelli cellulari pertinenti alla malattia.
ERRβ Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ESRRB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ESRRB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ESRRB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ESRRB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.