EphB6 Lentiviral Activation Particles (m): sc-420202-LAC

Das murine Gen *Ephb6* kodiert EphB6, ein atypisches Mitglied der Eph-Rezeptor-Tyrosinkinase-Familie mit eingeschränkter katalytischer Aktivität, das ephrin‑B‑abhängige Zell‑Zell‑Kommunikation moduliert. Über Interaktionen mit anderen Eph-Rezeptoren und Ephrin-Liganden trägt EphB6 zu kontaktabhängiger Signalübertragung bei, die Zytoskelett-Umbau, Adhäsion und Migration beeinflusst, mit nachgeschalteten Effekten auf Signalwege wie die Rho‑Familie der GTPasen und die MAPK/ERK‑Dynamik. *Ephb6* wird u. a. im Kontext der Aktivierung von Immunzellen und der epithelialen Organisation untersucht, wo veränderte Eph/Ephrin‑Signalgebung die Gewebearchitektur und inflammatorische Mikroumgebungen umgestalten kann. Eine Fehlregulation EphB6‑assoziierter Signalwege wurde in experimentellen Modellen mit Veränderungen des Tumorzellverhaltens und des metastatischen Potenzials in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für mechanistische Studien krankheitsassoziierter zellulärer Phänotypen unterstreicht.

EphB6 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Ephb6-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

EphB6 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Ephb6-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen EphB6-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Ephb6-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.